本試劑盒用于定量檢測人血清、血漿或細(xì)胞培養(yǎng)上清液等樣本中天然 和重組 IL-1β濃度。使用前請仔細(xì)閱讀說明書并檢查試劑組分。 

檢測原理： 

     本實驗采用雙抗體夾心 ELISA。用抗人 IL-1β單克隆抗體預(yù)包被酶標(biāo) 板，加入適度稀釋的樣本和標(biāo)準(zhǔn)品，其中的 IL-1β會與其單抗結(jié)合，洗 去游離成分；加入生物素化的抗人 IL-1β抗體，抗人 IL-1β抗體與結(jié)合在單抗上的人 IL-1β結(jié)合而形成免疫復(fù)合物，洗去游離的成分；加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的親合素，生物素與親合素特異性結(jié)合，洗去未結(jié)合 的酶結(jié)合物；加入顯色劑，若反應(yīng)孔中有 IL-1β，辣根過氧化物酶會使 無色的顯色劑現(xiàn)藍色；加終止液變黃。在 450nm 下測 OD 值，IL-1β濃 度與 OD450 值之間呈正比，可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線計算出標(biāo)本中 IL-1β濃度。

其它實驗材料(不提供，但可協(xié)助購買) : 

1. 酶標(biāo)儀(450nm) 

2. 高精度可調(diào)移液器及吸頭：0.5-10,2-20,20-200,200-1000μl。 一次檢測樣品較多時，最好用多通道移液器。

3. 自動洗板機或洗瓶 

4. 37℃溫箱 

5. 雙蒸水或去離子水

6. 坐標(biāo)紙 

7. 量筒

注意事項： 

1. 試劑盒保存在2-8℃，除復(fù)溶后的標(biāo)準(zhǔn)品，其它成分不可冷凍。 

2. 濃縮生物素化抗體(2a)、濃縮酶結(jié)合物(3a)裝量極少，運輸中顛 簸和可能的倒置會使液體沾到管壁或瓶蓋。使用前請離心處理以 使附著于管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。 

3. 不同批號試劑不可混用。 

4. 為避免交叉污染請使用一次性吸頭。 

5. 終止液和顯色劑具腐蝕性，避免皮膚及粘膜直接接觸，一旦接觸到這些液體，請盡快用大量水沖洗。

6. 使用干凈的塑料容器配制洗滌液，使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。 

7. 洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。

8. 不要用其它來源的試劑混合或替代該產(chǎn)品的組分，不同批號的試劑盒組份不能混用，請在有效日期內(nèi)使用本產(chǎn)品。

9. 在試驗中標(biāo)準(zhǔn)品和樣本檢測時建議作雙復(fù)孔或三復(fù)孔，加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)孔孵育的時間一樣。 

10. 充分混勻?qū)Ψ磻?yīng)結(jié)果尤為重要，最好使用微量振蕩器(使用最低頻率進行振蕩)。

11. 避免操作過程中酶標(biāo)板干燥，干燥會使酶標(biāo)板上生物成分迅速失活，影響實驗結(jié)果。 

12. 適當(dāng)?shù)南♂寴悠?，使樣品值落在?biāo)準(zhǔn)曲線范圍內(nèi)，根據(jù)待測因子含量高、中、低的不同，建議采用1:100、1:10、1:2稀釋樣品。 如果樣品OD值高于最高標(biāo)準(zhǔn)，適當(dāng)增加稀釋度并重復(fù)檢測。 

13. 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液，操作人，移液方式，洗滌方法，孵育時間及溫度， 試劑盒批次的不同均可能會導(dǎo)致結(jié)果的差異。 

14. 此法可有效的消除可溶性受體、結(jié)合蛋白以及生物樣品中的其他 因素的干擾。